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2×高保真PCR預(yù)混液(PCR系列)

2×高保真PCR預(yù)混液(PCR系列)

簡(jiǎn)要描述:
2×高保真PCR預(yù)混液(PCR系列)
用途
長(zhǎng)、短片段高保真DNA片段擴(kuò)增。擴(kuò)增的特異性好。產(chǎn)品的反應(yīng)靈敏度高,擴(kuò)增的特異性好。

更新時(shí)間:2025-01-13

訪問(wèn)量:146

廠商性質(zhì):代理商

生產(chǎn)地址:

2×高保真PCR預(yù)混液(PCR系列)
1. 產(chǎn)品描述:

信勵(lì)致和®2×高保真PCR預(yù)混液包含Pfu DNA Polymerase、dNTP 以及優(yōu)化的緩沖體系,只需加入引物和模板即可進(jìn)行擴(kuò)增,減少了移液操作,提高了檢測(cè)通量和結(jié)果的重現(xiàn)性。體系中加入的保護(hù)劑使得Pfu DNA Polymerase經(jīng)過(guò)反復(fù)凍融后仍可保持穩(wěn)定的活性;體系中不包含電泳指示劑。通過(guò)改造,信勵(lì)致和的Pfu DNA Polymerase在長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力、擴(kuò)增特異性以及擴(kuò)增產(chǎn)量方面得到了大幅度提升。其錯(cuò)配率是普通Taq酶的1/83,用于細(xì)菌、真菌、植物組織、動(dòng)物組織的直接PCR,擴(kuò)增產(chǎn)物為平端。


2. 產(chǎn)品特點(diǎn):

(1)本產(chǎn)品為高保真PCR擴(kuò)增試劑,產(chǎn)品的反應(yīng)靈敏度高,擴(kuò)增的特異性好。

(2)本產(chǎn)品可進(jìn)行長(zhǎng)片段基因擴(kuò)增,使用 λDNA、質(zhì)粒等簡(jiǎn)單模板,可以有效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)15 kb的片段;使用基因組DNA等復(fù)雜模板,可以擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)10 kb的片段。

3.用途:
長(zhǎng)、短片段高保真DNA片段擴(kuò)增。

2×高保真PCR預(yù)混液(PCR系列)

1. 產(chǎn)品組分:

組分/含量

AB0111

AB0112

2×Pfu PCR Mix

1 mL

5×1 mL


2. 儲(chǔ)運(yùn)條件:

-25~-15℃保存12個(gè)月,干冰運(yùn)輸。


3. 注意事項(xiàng):

使用前混勻,產(chǎn)品避免反復(fù)凍融。


1. 產(chǎn)品擴(kuò)增效果測(cè)試:

2×高保真PCR預(yù)混液(PCR系列)


在一致條件下,以2000 bp的λDNA和5000 bp的質(zhì)粒為模板進(jìn)行擴(kuò)增測(cè)試,結(jié)果如上圖所示,我司的2×高保真PCR預(yù)混液擴(kuò)增產(chǎn)物量明顯高于市場(chǎng)典型競(jìng)品,本產(chǎn)品具有很好的擴(kuò)增效果。


2. 擴(kuò)增模板兼容性測(cè)試:

2×高保真PCR預(yù)混液(PCR系列)


使用2×高保真PCR預(yù)混液分別以λDNA、質(zhì)粒、基因片段為模板進(jìn)行目的片段擴(kuò)增,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如上圖所示,測(cè)試使用的三種模板,本產(chǎn)品均能成功完成擴(kuò)增,實(shí)驗(yàn)結(jié)果有力地證明了本產(chǎn)品的模板兼容性好。


常見(jiàn)問(wèn)題

1. 產(chǎn)物沒(méi)有或很少?

原因分析:模板濃度過(guò)低;實(shí)驗(yàn)樣品DNA損傷或降解;PCR條件未優(yōu)化;退火溫度過(guò)高;延伸時(shí)間太短;循環(huán)次數(shù)太少;引物設(shè)計(jì)不完善;引物濃度過(guò)低;Mg2+濃度未優(yōu)化;模板質(zhì)量太差。

解決方案:建議DNA樣品不要反復(fù)凍融,以免造成DNA的損失;優(yōu)化PCR條件,對(duì)于基因片段較長(zhǎng)的片段適當(dāng)增加延伸時(shí)間,增加循環(huán)數(shù)。

2. 產(chǎn)物為多條帶?

原因分析:引物濃度為優(yōu)化或者引物降解;退火溫度過(guò)低。

解決方案:建議將引物置于4℃或者-20℃保存;適當(dāng)調(diào)整退火溫度。

3. 產(chǎn)物有污染?

原因分析:模板用量過(guò)多;Mg2+濃度未優(yōu)化;PCR中的長(zhǎng)片段來(lái)源于長(zhǎng)的基因組DNA。

解決方案:適當(dāng)減少模板用量;盡量使用雜質(zhì)含量少的模板進(jìn)行擴(kuò)增。











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